原文标题:Evaluation of the infectiousness level of three wild-type porcine reproductive and respiratory syndrome viruses (PRRSV) variants
本研究旨在将最近出现的PRRS L1C 1-4-4变异株与过去引起全国性重大暴发的其他两种毒株(即L1A 1-7-4和L9 1-4-2)进行比较,以了解这些变异株是否具有相同的传播能力、排毒模式以及在感染猪中是否产生相似的病理变化。
为研究不同的毒株,选PRRSV双阴的108头3周龄大的阉公猪,每种毒株36头,每组6头,随机分成5组攻毒组和1组对照组(negative control, NC)(如表2)。各处理组被单独饲养在不同的房间。同一组在同一空间,但不能“鼻对鼻”的接触。所研究的3种毒株在MARC-145细胞系上培养至105TCID50 /mL,通过10倍倍比稀释为104-100 TCID50/mL 5种浓度。随后,各个毒株均用稀释好的5种浓度对其实验组进行滴鼻攻毒,每个鼻孔滴鼻1mL,对照组不进行攻毒。
在攻毒后0、1、2、4、7、11、16、21、26和30天(days post-challenge, DPC)采集血液、鼻拭子和直肠拭子,以评估感染情况,通过RT-PCR评估排毒情况。研究人员采集每头猪的样本时,均需要更换手套、口罩和工作服。DPC11时每组中取两头试验猪实施安乐死,取脑、肺脏和淋巴结等组织进行组织病理学检测。在该研究中,我们分析了DPC4时的各项试验结果,因为这个时间是所有处理组中感染猪数量变化最大的。采用 Karber法对感染滴度进行测定,评估在DPC4时最低感染剂量(Minimum Infectious Dose, MID),并应用概率模型,估算中位感染剂量(Median Infectious Dose, ID50, 感染50%的接种动物所需要的剂量)。
结果显示,DPC4时,毒株L1C 1-4-4的MID是101.5TCID50 /mL(4/6),毒株L1A 1-7-4的MID是101.5TCID50 /mL(2/6),毒株L9 1-4-2的MID是101.8TCID50 /mL(1/6)。各实验组的ID50结果为:L1C 1-4-4是101.3TCID50 /mL(95%置信区间100.4 -102.2)、L1A 1-7-4 是102.3TCID50 /mL(95% 置信区间101.6 -103.0)、L9 1-4-2 是102.6TCID50 /mL(95%置信区间102.0 -103.2)。DPC1 开始在鼻腔拭子中检测到病毒,DPC7 前CT值逐渐下降。粪便排毒开始于DPC4,DPC7 达到峰值;在研究期间,所有病毒在鼻腔和直肠排毒模式相似,不同浓度接种组间略有差异。组织病理学结果显示,所有接种组中,无论接种浓度如何,所有攻毒猪肺部都发生了不同程度的病变。但与其他两种毒株相比,感染L1C 1-4-4的猪病变更严重、持续时间更长。在L1C 1-4-4接种组中,每个浓度组至少有1头猪出现脑部病变,其他毒株组中,每组只有1头猪出现脑部病变。L1C 1-4-4组中大多出现心脏病变。
本研究结果表明,与L1A 1-7-4和L9 1-4-2变异株相比,L1C 1-4-4毒株只需要很少的病毒粒子就能在DPC4 感染一半的攻毒猪。此外,L1C 1-4-4毒株可以导致更多的病理变化,对肺脏、心和脑有更高的嗜性。
来源:2023 NAPRRS/NC229: Proceedings of International conference of Swine Viral Diseases